웨스턴 블롯의 일반적인 시약 배합
웨스턴 블롯; 용해 완충액; 전기영동 관련 시약; SDS-PAGE
웨스턴 블롯팅은 복잡한 혼합물에서 특정 단백질을 검출하기 위해 널리 사용되는 면역학적 방법입니다. 겔 전기영동의 분리능과 항체의 특이성을 결합한 방법입니다. 먼저 세포 또는 조직에서 단백질을 추출하고, 이어서 SDS-PAGE를 사용하여 분자량에 따라 단백질을 분리합니다. 다음으로 단백질을 막(일반적으로 니트로셀룰로오스 또는 PVDF)에 전사하고 특이적 항체를 사용하여 검출합니다. 1차 항체는 표적 단백질에 결합하고, 리포터 효소로 표지된 2차 항체는 화학발광, 형광 또는 비색 검출에 의해 단백질을 가시화합니다.