에피토프 태그

에피토프 태그

에피토프 태그는 면역 블로팅, 면역 침강 및 면역 염색 기술을 사용하여 단백질의 라벨링과 검출에 유용합니다. 작은 크기 덕분에 이 태그는 표지된 단백질의 생화학적 성질에 영향을 미칠 가능성이 낮습니다.

여러 가지 다른 에피토프 태그가 현재 일반적으로 사용되고 쉽게 이용 가능합니다. 예를 들어, 다양한 플라스미드에는 아미노 말단 태그로 히스티딘 (6xHis) 잔기를 6 개 포함하고 확장된 다중 클로닝 사이트를 가진 DNA 를 암호화합니다. 발현된 재조합 단백질의 6xHis 태그는 Ni2+ 친화 수지와의 효율적인 결합과 단 단계 크로마토그래피를 통한 정제를 가능하게 합니다 (1). 다른 단백질 태그 시스템과 마찬가지로 (2), 이 폴리히스티딘 태그는 트롬빈 및 엔테르키나제와 같은 프로테아제가 인식하는 부위에서 절단될 수 있어 관심 있는 단백질을 분리할 수 있습니다 (1). 글루타티온 S-트랜스퍼라제 (GST) 는 쉽게 검출 가능한 태그와 단백질의 생물학적 기능에 거의 영향을 미치지 않는 간단한 정제 과정을 제공하므로 또 다른 널리 사용되는 융합 파트너입니다. 지난 10 년간 원핵생물 및 진핵생물 시스템 모두를 위해 GST-태그를 포함하는 수많은 벡터가 개발되었습니다 (3-5). 인플루엔자 헤마글루티닌 단백질의 에피토프에서 유래한 HA 태그는 또한 발현 벡터에서 일반적인 에피토프 태그로 광범위하게 사용되어 왔으며 (6), Myc 에피토프 태그는 박테리아, 효모, 곤충 및 포유류 세포 시스템에서 재조합 단백질의 발현을 검출하는 데 일반적으로 사용됩니다 (7). 마지막으로, DYKDDDDK 펩타이드는 발현 벡터에서 일반적인 에피토프 태그로 광범위하게 사용되었으며 아미노 말단 또는 카르복시 말단 융합으로 구성됩니다 (8).

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