주요 기능
| 전체 이름 | 대식세포 이동 억제 인자 |
|---|---|
| 동의어 | MIF, GIF, GLIF, Mmacrophage migration inhibitory factor (glycosylation-inhibiting factor), macrophage migration inhibitory factor |
| 분석 유형 | 샌드위치 |
| 반응성 | 생쥐 |
| 측정 범위 | 15.63-1000pg/mL |
| 민감도 | 9.38pg/mL |
| 샘플 유형 | 혈청, 혈장 및 기타 생체액 |
| 샘플 부피 | 100μL |
| 검출 파장 | OD450 |
| 운송 온도 | 2-8°C |
| 특이성 | 해당 키트는 샘플에서 마우스 MIF를 검출했으며, 유의미한 종간 반응은 발견되지 않았습니다. |
| 마이크로플레이트 | 96-wells plate breakable into 12 x 8 wells strip |
시험 원리
| 이 ELISA 키트는 샌드위치 ELISA 원리를 사용합니다. 키트에 포함된 마이크로 ELISA 플레이트는 마우스 MIF에 특이적인 항체로 미리 코팅되어 있습니다. 표준 용액 또는 시료를 마이크로 ELISA 플레이트의 각 웰에 첨가하여 특이 항체와 결합시킵니다. 그 후, 마우스 MIF에 특이적인 비오틴화 검출 항체와 아비딘-과산화효소(HRP) 접합체를 순차적으로 각 웰에 첨가하고 반응시킵니다. 반응 후 남은 잔여물을 세척합니다. 기질 용액을 각 웰에 첨가합니다. 마우스 MIF, 비오틴화 검출 항체 및 아비딘-HRP 접합체가 모두 존재하는 웰만 파란색으로 나타납니다. 효소-기질 반응은 정지 용액을 첨가하여 종료되며, 색깔은 노란색으로 변합니다. 흡광도(OD)는 450nm ± 2nm 파장에서 분광광도계를 이용하여 측정합니다. OD 값은 마우스 MIF의 농도에 비례합니다. 시료의 OD 값을 표준 곡선과 비교하여 시료 내 마우스 MIF의 농도를 계산할 수 있습니다. |
ELISA 키트 구성 요소
수령 후 즉시 언패킹하고 지침에 따라 보관하십시오.
| 구성 요소 | 사양 | 보관 및 참고 사항 |
|---|---|---|
| 마이크로 플레이트 | 96T: 8 wells×12 strips 48T: 8 wells×6 strips | 미개봉: -20°C, 12개월 미사용: 알루미늄 호일 백에 넣고 밀봉한 후 -20°C에 보관하십시오. |
| 기준 표준물질 | 96T: 2 vials 48T: 1 vial | 미개봉: -20°C, 12개월 각 실험마다 새로 녹인 표준물질을 사용하십시오. 녹인 후 사용하지 않은 표준물질은 폐기하십시오. |
| 바이오틴화 검출 항체 농축액 (100×) | 96T: 120μL×1 vial 48T: 60μL×1 vial | 미개봉: -20°C, 12개월 미사용: 농축액을 밀봉하고 -20°C에 보관하십시오. 작업 용액은 폐기하십시오. |
| HRP 접합체 농축액 (100×) | 96T: 120μL×1 vial 48T: 60μL×1 vial | 미개봉: -20°C(광차단), 12개월 미사용: 농축액을 밀봉하고 -20°C에 보관하십시오. 작업 용액은 폐기하십시오. |
| 바이오틴화 검출 항체 희석액 | 14mL×1 | 2-8℃, 12개월 |
| HRP 접합체 희석액 | 14mL×1 | 2-8℃, 12개월 |
| 기준 표준물질 & 샘플 희석액 | 20mL×1 | 2-8℃, 12개월 |
| 세척 버퍼 농축액 (25×) | 30mL×1 | 2-8℃, 12개월 |
| 기질 시약(TMB) | 10mL×1 | 2-8°C(광차단),12개월 |
| 정지 용액 | 7mL×1 | 2-8°C/상온 |
분석 절차
전형적인 데이터
생쥐 MIF ELISA 표준 곡선
전형적인 데이터는 참고용으로만 제공되며 각 실험마다 곡선을 다시 그려야 합니다. 적합한 함수로 로지스틱 함수가 권장됩니다.
정밀도
내부 분석 정밀도 (분석 내 정밀도): 알려진 농도의 세 가지 샘플을 한 플레이트에서 20회 시험하여 내부 분석 정밀도를 평가했습니다.
외부 분석 정밀도 (분석 간 정밀도): 알려진 농도의 세 가지 샘플을 20개의 별도 분석에서 시험하여 외부 분석 정밀도를 평가했습니다. 분석은 적어도 세 명의 기술자가 두 번째 구성 요소를 사용하여 수행했습니다.
| 내부 분석 정밀도 | 외부 분석 정밀도 | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 샘플 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| 평균 (pg/mL) | 46.54 | 153.45 | 363.49 | 44.92 | 150.85 | 385.35 |
| 표준 편차 | 2.42 | 7.32 | 16.36 | 2.88 | 6.74 | 19.92 |
| CV(%) | 5.21 | 4.77 | 4.5 | 6.42 | 4.47 | 5.17 |
회수율
다양한 매트릭스에서 분석 범위 전체에 걸쳐 샘플에 세 가지 다른 수준으로 첨가된 생쥐 MIF의 회수율을 평가했습니다.
| 샘플 유형 | 범위 (%) | 평균 회수율 (%) |
|---|---|---|
| 혈청(n=8) | 87-99 | 94 |
| EDTA 혈장 (n=8) | 95-110 | 100 |
| 세포 배양 배지 (n=8) | 85-97 | 92 |
선형성
분석의 선형성을 평가하기 위해 다양한 매트릭스에서 고농도의 생쥐 MIF을 함유하고/또는 첨가된 샘플을 기준 표준물질 및 샘플 희석액으로 희석하여 분석의 동적 범위 내에 값을 갖는 샘플을 생성했습니다.
